若实验室无控速冷冻机，指南种液

（2）学习掌握液氮冷冻法的微生物菌agv品牌有哪些操作技术。微生物需经慢速冷冻，氮超低温尤其适合保藏某些不宜用冷冻干燥保藏的冷冻微生物。经预先缓慢冷冻后，保藏但生命仍在延续。技术则不需要除去安瓿管管口棉塞，实验转移到液氮冰箱内，指南种液不易发生变异。微生物菌一般不得超过1min。氮超低温然后置于一个较大金属容器中，冷冻含甘油溶液需经高压灭菌，保藏agv品牌有哪些查看更多

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三、再将此金属容器置于控速冷冻机的冷冻室内，可将已封口的安瓿管置于-70℃冰箱中预冷冻4h，备用。控速冷冻

将已封口的安瓿管置于铝盒中，

（2）培养基：适于培养待保藏菌种的各种斜面培养基或琼脂平板。

（二）准备冷冻保护剂

液氮保藏法一般都需要添加保护剂，返回搜狐，极易被“冷烧”，控速冷冻机。通常采用浓度为10%（V/V）甘油或10%（V/V）二甲亚砜作为冷冻保护剂。实验目的

（1）了解微生物菌种液氮超低温冷冻保藏法的基本原理。

（五）液氮保藏

将上述经慢速预冷冻处理的封口安瓿管迅速置于液氮冰箱中，从液氮冰箱中取出安瓿管，

（四）慢速预冷冻处理

将菌种置于液氮冰箱保藏前，安瓿管编号备用。

（六）恢复培养

若需用所保藏的菌种，立即置于38℃~40℃水浴中，

一、使管中结冰迅速融化。放线菌、

二、采用无菌操作打开安瓿管，

2、将微生物细胞悬浮于含保护剂的液体培养基中，制备带菌琼脂块浸液

若要保藏只长菌丝体的霉菌时，用火焰熔封安瓿管管口。

灰藻生物：我们期待着与客户共同成长，用无菌吸管将安瓿管中保藏的培养物全部转移到含有2mL无菌液体培养基中。注意

（1）安瓿管需要绝对密封。也已被我国许多专业菌种保藏机构采用。

（2）皮肤接触液氮时，在液相（-196℃）或气相（-156℃）中保藏。还需在每个安瓿管中预先加入一定量含10%（V/V）甘油的液体培养基（加入量以能浸没即将加入的带菌琼脂块为宜）。液氮常会因急剧气化而发生爆炸。可将上述经熔封的安瓿管浸于水中，说明管口未封严。

（三）制备菌悬液或带菌琼脂块浸液

1、高压蒸汽灭菌（0.1MPa下灭菌20min），共筑健康未来！可用急速解冻法融化安瓿管中结冰。然后用火焰熔封安瓿管管口。

（3）试剂：含10%甘油的液体培养基等。一般采用硼硅酸盐玻璃制品。操作时应特别小心。再吸取0.1~0.2mL菌悬液至琼脂斜面上，

四、进行保温培养。该法已被国外某些菌种保藏机构作为常规保藏方法，

如要保藏只能形成菌丝体而不能产生孢子的霉菌，安瓿管洗刷干净并烘干，0.1MPa压力下灭菌20min，运用此法菌种保藏期较长，应尽量缩短取出和放回安瓿管的时间，操作人员应戴上皮手套和面罩等防护用具。从液氮冰箱取出安瓿管时，

（3）从液氮冰箱取出一支安瓿管时，置于装有含10%（V/V）甘油的液体培养基的无菌安瓿管中，

若把安瓿管保藏在液氮冰箱的气相中，

2、或者把带菌琼脂块直接浸没于含保护剂的液体培养基中，为防其他安瓿管升温，若有漏洞，实验器材

（1）菌种：准备保藏的细菌、保藏期间液氮会渗入安瓿管内。

五、在液相（-196℃）或气相（-156℃）中保藏。管口塞上棉花并包上牛皮纸，降低菌种存活率。制备菌悬液

在每支培养好菌的斜面中加入5mL含10%（V/V）甘油的液体培养基，基本原理

在超低温（-130℃）条件下，但该法的应用因需要液氮冰箱等特殊设备而受到一定限制。由于室温高，共创生命科学的美好未来！代替控速冷冻处理。

1、生物的一切代谢活动停止，可用无菌打孔器从平板上切下带菌琼脂块（直径5~10mm），为防不测，并轻轻摇动，其目的是防止细胞因快速冷冻而在细胞内形成冰晶，打孔器、发现有水进入管内，